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壳聚糖纳米细胞介导基因转染的研究

         

摘要

目的构建核壳型壳聚糖(chitosan,CTS)纳米细胞(nanocell,NC),探讨其作为基因转染载体的可行性。方法以壳聚糖为载体材料,pEGFP-N1为模型质粒,制备质粒复合物pEGFP-N1/CTS—NP。以pEGFP-N1/CTS-NP为核心,用复乳法外包含十八胺(stearylamine,SA)的脂质体膜制备纳米细胞pEDFP-N1/CTS—SANC,用CTS对其进行包覆制成CTS-(pEGFP-N1/CTS-SANC),测定其形态、粒径与电位。用MTF法测定NC的细胞毒性,用荧光显微镜及流式细胞仪定性、定量地评价其在HeLa细胞中的转染率。结果所制备的样品多呈类球形,粒径与电位分别分布在120—220nm与40-65mV之间。pEGFP-N1/CTS-SANC与CTS-(pEGFP-N1/CTS—SANC)均可将质粒转染到HeLa细胞并表达绿色荧光蛋白。CTS-(pEGFP-N1/CTS—SANC)可降低pEGFP-N1/CTS-SANC的毒性,在相同质粒用量下,使HeLa细胞存活率从81.8%增至100.9%。转染率从3.90%增至8.13%。达市售脂质体转染试剂的76%。结论壳聚糖纳米细胞有望作为基因转染的载体。

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