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小鼠髓母细胞瘤干细胞分离培养及干细胞标记物的分析

         

摘要

目的旨在建立自发髓母细胞瘤模型小鼠肿瘤干细胞分离培养方法,观察其在体外形成克隆的能力,对可能的肿瘤干细胞标志分子CD44、CDl33和CDl5进行流式细胞术分析鉴定。方法将小鼠髓母细胞瘤组织通过温和消化液消化分离成单细胞悬液,于干细胞培养基中培养。计算其细胞球形成率。于含血清培养基中培养观察分化能力。利用流式细胞术对其表面可能的干细胞表面标记分子进行分析鉴定。结果从模型小鼠髓母细胞瘤组织中成功分离培养髓母细胞瘤原代细胞.原代细胞可形成具有高度的自我更新和增殖能力的细胞球;细胞球可在含血清培养基中贴壁分化成为神经元样细胞:干细胞表面标记分子流式细胞术分析表明髓母细胞瘤干细胞中CD44表达较高,CDl33及CDl5的表达无差异或者降低。结论髓母细胞瘤肿瘤细胞中存在一定量的具有自我更新增殖能力、高表达CD44的肿瘤干细胞。并能在体外将其分离培养、连续传代及诱导发生分化。

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