miR-155通过抑制靶基因Rheb促进血管内皮细胞自噬

殷霜霜; 陈德鹏; 潘旭东; 马爱军

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miR-155通过抑制靶基因Rheb促进血管内皮细胞自噬

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目的研究miR-155抑制Rheb促进血管内皮细胞自噬的机制.方法应用生物信息学方法预测Rheb基因3′UTR区与miR-155的结合位点并通过双荧光素酶报告基因试验进行验证;转染miR-155 mimics和miR-155 inhibitor进入氧化低密度脂蛋白刺激的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),实时荧光定量PCR法检测细胞内miR-155及Rheb mRNA含量,Western印迹法检测细胞中Rheb蛋白含量;电子显微镜观察细胞内自噬情况.结果双荧光素酶报告基因试验验证结果表明,成功预测了miR-155与Rheb基因3′UTR区的结合位点,与对照组相比,miR-155与野生型荧光素酶报告基因共转染可以明显抑制或增强荧光素酶活性(P<0.05).Western印迹检测发现转染miR-155 mimics和miR-155 inhibitor能明显抑制或促进HUVEC内Rheb蛋白的表达(P均<0.05).实时荧光定量PCR检测结果表明,miR-155 mimics组细胞内miR-155明显上升,而miR-155 inhibitor组细胞内miR-155含量明显下降(P均<0.05),miR-155 mimics转染的内皮细胞中Rheb mRNA表达水平明显降低,而miR-155 inhibitor转染的内皮细胞中Rheb mRNA表达水平明显增高.电子显微镜结果显示:miR-155 mimics组能够显著促进脐静脉内皮细胞的自噬活性,miR-155 inhibitor组能够降低内皮细胞自噬活性.结论 miR-155通过抑制靶基因Rheb促进血管内皮细胞自噬.

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来源
《医学分子生物学杂志》 |2021年第4期|267-272|共6页
作者
殷霜霜; 陈德鹏; 潘旭东; 马爱军;
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作者单位

南阳医专第一附属医院神经内科河南省南阳市 473000;

南阳医专第一附属医院神经内科河南省南阳市 473000;

青岛大学附属医院神经内科山东省青岛市 266000;

青岛大学附属医院神经内科山东省青岛市 266000;

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正文语种 chi
中图分类神经病学;
关键词
miR-155; Rheb; 血管内皮细胞; 自噬;

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