EGFR过表达对原代肝细胞AKT的激活作用

徐俊楠; 何逸飞; 王科嘉; 朱晓彤; 陈玉霞; 刘志民; 章卫平

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EGFR过表达对原代肝细胞AKT的激活作用

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目的构建含表皮生长因子受体EGFR基因的重组腺病毒载体,并观察所构建腺病毒介导的EGFR过表达对其下游的AKT通路的激活.方法将EGFR的cDNA片段克隆至pshuffle-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-EGFR,之后在Ad293细胞中进行包装以及扩增,并对病毒效价进行检测;最后利用所制备的腺病毒Ad-EGFR感染小鼠原代肝细胞,利用蛋白印迹法Western blot检测EGFR在原代肝细胞中的表达及其对信号分子AKT的活化作用.结果成功制备具有生物学活性的EGFR重组腺病毒,并观察到该重组腺病毒在Huh-7细胞介导EGFR的过表达以及在原代肝细胞中对EGFR下游PI3K-AKT通路的激活作用.结论所构建的EGFR重组腺病毒载体可以介导细胞中EGFR的过表达并激活PI3K-AKT信号通路,为今后研究EGFR的相关生物学功能奠定了基础.

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来源
《医学研究杂志》 |2013年第12期|19-22|共4页
作者
徐俊楠; 何逸飞; 王科嘉; 朱晓彤; 陈玉霞; 刘志民; 章卫平;
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作者单位

200433上海,第二军医大学病理生理教研室;

200433上海,第二军医大学病理生理教研室;

第二军医大学附属长征医院内分泌科;

200433上海,第二军医大学病理生理教研室;

200433上海,第二军医大学病理生理教研室;

200433上海,第二军医大学病理生理教研室;

第二军医大学附属长征医院内分泌科;

200433上海,第二军医大学病理生理教研室;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
重组腺病毒; 表皮生长因子受体; 原代肝细胞;

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