miR-495对食管癌细胞株Eca109在不同放射剂量和顺铂浓度作用的影响及机制研究

刘伟; 周杨; 边超; 东丽

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miR-495对食管癌细胞株Eca109在不同放射剂量和顺铂浓度作用的影响及机制研究

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目的探讨微小核糖核酸(microRNA,miR)-495对食管癌细胞株Eca109在不同放射剂量和顺铂浓度作用下的影响及机制。方法采用分次放疗递增法诱导建立放射抵抗型细胞株Eca109(Eca109-RAD)及分次顺铂递增法诱导建立顺铂耐药型细胞株Eca109(Eca109-DDP),实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-495在Eca109-RAD及Eca109-DDP细胞中的表达。Eca109-RAD及Eca109-DDP分为NC组和miR-495 mimic组,转染后qRT-PCR检测各组细胞中miR-495的表达,CCK8检测不同放射剂量对Eca109-RAD细胞和Eca109细胞存活能力的影响,及不同浓度的顺铂对Eca109-DDP细胞和Eca109细胞存活能力的影响,NC组和miR-495 mimic组经放射及顺铂处理后,采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,Western blot检测各组细胞中凋亡相关蛋白caspase 3,Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果与Eca109细胞(0.99±0.01)相比,Eca109-RAD细胞中miR-495的表达(0.48±0.03)及Eca109-DDP细胞中miR-495的表达(0.52±0.05)均降低,差异有统计学意义(t=27.930,15.970,均P=0.000)。与NC组细胞相比,miR-495 mimic组Eca109-RAD细胞中miR-495的表达(4.82±0.48 vs 1.00±0.03)及Eca109-DDP细胞中miR-495的表达(5.68±0.54 vs 1.00±0.01)均显著增加,差异有统计学意义(t=13.760,15.100,均P=0.000)。与NC组相比,miR-495 mimic组Eca109-RAD细胞对放疗敏感度增加,差异均有统计学意义(t=6.780~18.860,P=0.000~0.001);与NC组相比,miR-495 mimic组Eca109-DDP细胞对顺铂敏感度增加,差异均有统计学意义(t=7.510~21.630,均P=0.000)。经放射处理后,与NC组相比,miR-495 mimic组Eca109-RAD细胞平板克隆形成能力(46.33±5.69个vs 93.33±4.51个)及Eca109-DDP(34.67±2.52个vs 89.00±4.03个)细胞平板克隆形成能力显著降低(t=11.210,19.800,均P=0.000)。经放射处理后,与NC组相比,miR-495 mimic组Eca109-RAD细胞凋亡率(25.66%±2.41%vs 8.39%±0.82%)及Eca109-DDP细胞凋亡率(21.05%±5.37%vs 8.67%±1.15%)均显著增加(t=11.750,10.030,P=0.000,0.001)。经放射处理后,与NC组相比,miR-495 mimic组Eca109-RAD细胞及Eca109-DDP细胞中Bcl-2蛋白表达均降低(t=4.650,7.450,P=0.006,0.001),Bax和caspase 3蛋白的表达均增加(t=7.100~14.290,P=0.000~0.001)。结论MiR-495可能通过调控凋亡相关蛋白促进食管癌细胞放化疗敏感度。

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来源
《现代检验医学杂志》 |2022年第4期|13-17|共6页
作者
刘伟; 周杨; 边超; 东丽;
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作者单位

内蒙古自治区人民医院放射治疗科;

内蒙古自治区人民医院肿瘤内科;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类食管肿瘤;实验室诊断;
关键词
食管癌; 微小核糖核酸-495; 凋亡; 放化疗敏感度;

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