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p120-catenin通过Kaiso在转录水平上调控肺癌细胞系LTEP-a-2中β-catenin的表达

         

摘要

目的:探讨肺癌细胞系中p120-catenin (p120ctn)调节β-catenin转录的分子机制.推测p120ctn 可能通过其分子伴侣Kaiso进而发挥调节β-catenin转录的重要功能.方法:转染、Real-Time PCR、BSP测序、染色质免疫共沉淀及蛋白质免疫共沉淀等多种研究方法验证我们的推测.结果:对肺癌细胞系中β-catenin启动子区域的测序结果发现,LTEP-a-2中存在着可能与Kaiso结合的甲基化的CpG双核苷酸序列和KBS序列.去甲基化试剂5-Aza-CdR能使肺癌细胞系中β-catenin的mRNA表达明显上调.转染Kai-so后,肺癌细胞系中Kaiso的高表达可明显下调β-catenin的mRNA表达.用5-Aza-CdR处理肺癌细胞系后再转染Kaiso,细胞系中β-catenin的mRNA表达上调.染色质免疫共沉淀结果显示LTEP-a-2中Kaiso只能够与甲基化的CpG双核苷酸序列结合而不与KBS序列结合;蛋白质免疫共沉淀显示Kaiso能够与p120ctn结合.结论:肺癌细胞系LTEP-a-2中p120ctn调节β-catenin的转录是通过转录抑制因子Kaiso与β-catenin启动子区域甲基化的CpG双核苷酸序列而实现的.

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