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葛根素通过TGF-β/Smads信号通路促进前列腺癌细胞凋亡的机制

         

摘要

cqvip:目的:探讨葛根素(puerarin)通过TGF-β/Smads信号通路促进前列腺癌细胞凋亡的机制。方法:将不同浓度葛根素(0、25、50、75和100μmol/L)分别孵育前列腺癌PC3细胞,并采用台盼蓝染色(trypan blue)检测细胞增殖情况;流式细胞术方法检测不同剂量葛根素对细胞凋亡率的影响;使用RT-PCR和Western blot检测葛根素对TGF-β1和Smad3的影响;采用TGF-β1抑制剂P144抑制TGF-β1活性,使用Western blot验证P144对TGF-β1表达含量的影响并检测其对细胞凋亡蛋白Casepase3、Bcl-2表达水平的影响。结果:葛根素以时间和剂量依赖的方式抑制PC3细胞的生长(P<0.05);25、50、75和100μmol/L葛根素对细胞存活的抑制率分别为25.7%、28.9%、32.5%和56.3%;流式细胞术检测结果指出25、50、75和100μmol/L葛根素对PC3细胞的凋亡率分别为(4.36±2.62)%、(9.86±3.64)%、(15.95±5.22)%、(19.65±7.34)%,随着剂量的增长,PC3细胞凋亡率逐渐上升(P<0.05);RT-PCR和Western blot检测提示随着葛根素浓度的升高,TGF-β1、Smad3和Caspase3在mRNA和蛋白水平表达含量显著升高,而Bcl-2则显著降低(P<0.05);与葛根素单独处理组相比,葛根素+P144共处理组细胞,TGF-β1、Smad3和Caspase3蛋白表达水平显著下降,Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。随后的流式细胞术检测结果指出,与葛根素单独处理组比,使用葛根素+P144共处理组细胞凋亡水平显著下降(P<0.05)。结论:葛根素可能通过激活TGF-β/Smad受体信号通路诱导Bcl-2下调和促进Caspase3的上调,从而诱导前列腺癌PC3细胞凋亡。

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