ORCA3转录因子对红豆杉细胞中紫杉醇生物合成的影响

于小青; 杨海燕; 张蒙; 栗茂腾; 付春华; 余龙江

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ORCA3转录因子对红豆杉细胞中紫杉醇生物合成的影响

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ORCA3, induced by MeJA, is a transcriptional factor regulating primary and secondary metabolism of plants. In the present research, effects of ORCA3 on taxol yield in suspension-cultured Taxus were investigated via transformation. Firstly, ORCAi gene was cloned from Catharanthus roseus, then it was transferred into Taxus cell via Agrobacterium-mediated method. Totally, 20 transgenic cell lines were obtained, which were confirmed by PCR and β-Glucuronidase assay. Taxol contents of five positive transgenic cell lines quantified by HPLC, were 0. 5 - 2. 5 times higher than that of the negative control, and the highest one was 159. 315 μg/g. Therefore, the over-expression of ORCAi in transgenic Taxus cells might lead to an elevation of taxol yield, which lay a foundation for the creation of the high and stable taxol yield cell lines, and overcome the bottleneck for taxol production via the large-scale culture of Taxus cell.%ORCA3是一个受MeJA诱导的调控植物基础和次生代谢的转录调控因子.本文拟探讨ORCA3转录因子对红豆杉细胞中紫杉醇生物合成的影响,旨在为创制紫杉醇稳定高产的红豆杉细胞系,解决细胞大规模培养中紫杉醇含量低的瓶颈问题提供参考.从长春花中克隆ORCA3基因后,采用农杆菌介导法转入红豆杉细胞中,通过PCR、组织化学活性染色等检测法,筛选得到20余株转基因细胞系.HPLC检测转基因细胞系内紫杉醇含量表明:与阴性对照相比,转基因细胞系的紫杉醇含量增加了0.5 ～2.5倍,最高可达159.315μg/g.因此,ORCA3转录因子可以调控红豆杉细胞中紫杉醇合成.

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来源
《山地农业生物学报》 |2012年第3期|189-193|共5页
作者
于小青; 杨海燕; 张蒙; 栗茂腾; 付春华; 余龙江;
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作者单位

华中科技大学生命科学与技术学院,资源生物学与生物技术研究所,湖北武汉430074;

华中科技大学生命科学与技术学院;

华中科技大学生命科学与技术学院,资源生物学与生物技术研究所,湖北武汉430074;

华中科技大学生命科学与技术学院,资源生物学与生物技术研究所,湖北武汉430074;

华中科技大学分子生物物理教育部重点实验室,湖北武汉430074;

华中科技大学生命科学与技术学院,资源生物学与生物技术研究所,湖北武汉430074;

华中科技大学分子生物物理教育部重点实验室,湖北武汉430074;

华中科技大学生命科学与技术学院,资源生物学与生物技术研究所,湖北武汉430074;

华中科技大学分子生物物理教育部重点实验室,湖北武汉430074;

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正文语种 chi
中图分类基因工程的应用;
关键词
红豆杉; 遗传转化; ORCA3; 紫杉醇;

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