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促红细胞生成素对高糖环境下系膜细胞凋亡的影响及其可能机制

         

摘要

目的探究促红细胞生成素(EPO)在高糖环境下对正常人肾小球系膜细胞凋亡的影响及其可能机制,为延缓糖尿病肾病(DN)进展寻找新的治疗方法。方法体外培养正常人肾小球系膜细胞。将培养后的正常人肾小球系膜细胞随机分为8组:空白对照(A)组(未加任何刺激物),高糖(B)组(D-葡萄糖30mmol·L^-1),高渗(C)组(甘露醇25mmol·L^-1),EPO(D)组(EPO20U·mL^-1),低浓度EPO干预(E)组(D-葡萄糖30mmol·L^-1+EPO5U·mL^-1),中浓度EPO干预(F)组(D-葡萄糖30mmol·L^-1+EPO10U·mL^-1),高浓度EPO干预(G)组(D-葡萄糖30mmol·L^-1+EPO20U·mL^-1),Y27632(H)组(D-葡萄糖30mmol·L^-1+Rho激酶抑制剂10μmol·L^-1)。各组细胞均培养24h。RT-PCR检测各组RhoAmRNA、ROCK1mRNA的表达水平,流式细胞术检测各组的细胞凋亡。结果C、D、E3组系膜细胞凋亡率与A组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与B组比较,C、D、E、F、G5组系膜细胞凋亡率、RhoAmRNA、ROCK1mRNA表达水平均降低,H组系膜细胞凋亡率、ROCK1mRNA表达水平均降低(均P<0.05);与E组比较,F、G、H3组系膜细胞凋亡率均升高,RhoAmRNA、ROCK1mRNA表达水平均降低(均P<0.05);与F组比较,G、H2组系膜细胞凋亡率、ROCK1mRNA表达水平均降低,G组RhoAmRNA表达水平降低、H组RhoAmRNA表达水平升高(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,B组及E、F、G3组RhoAmRNA表达与ROCK1mRNA表达均呈正相关(r=0.829、0.898、0.831、0.861,均P<0.05)。结论EPO可抑制高糖诱导的正常人肾小球系膜细胞的凋亡,其作用机制可能与阻断RhoA/ROCK信号通路有关。

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