二种不同病毒基因表达调节元件对骨多形性蛋白12基因在COS细胞中的表达影响

刘金辉; Glenn Larsen

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二种不同病毒基因表达调节元件对骨多形性蛋白12基因在COS细胞中的表达影响

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目的　比较巨细胞病毒的早期启动子和腺病毒主要晚期启动子(MPL)、三联前导序列(TPL)和插入序列 (IVS)组合对BMP12在COS细胞中表达的影响。方法　BMP12cDNA分别克隆在pED载体中的腺病毒主要晚期启动子(MPL)、三联前导序列(TPL)和插入序列(IVS)组合下游,构建了表达质粒BMP12/pED。及克隆在AD1- 1载体中巨细胞病毒的早期启动子下游,构建了表达质粒BMP12/AD1 1。采用脂质体法将二个表达质粒分别转染入COS细胞。40h及60h后,分别取100μl培养上清进行Western印迹,检测所表达的BMP12蛋白。结果　 Western印迹结果显示:转染40hr后,只在BMP12/pED转染的COS细胞培养液检测出2个BMP12特异表达产物,大小约为50kD和44kD(较弱)。转染60h后,BMP12/Ad1 1转染的COS细胞培养液有3个BMP12特异表达产物,大小约为:50kD、40kD、15kD;BMP12/pED转染细胞培养液有4个BMP12特异表达产物,大小约为:50kD、 48kD、44kD、15kD。结论　腺病毒主要晚期启动子(MPL)、三联前导序列(TPL)和插入序列(IVS)组合的基因表达调节元件驱动的BMP12表达量高于巨细胞病毒的早期启动子;二种病毒基因表达调节元件驱动的BMP12表达产物的种类与大小均有差异。

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来源
《南昌大学学报：医学版》 |2005年第1期|33-35|共3页
作者
刘金辉; Glenn Larsen;
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作者单位

江西医学院微生物学教研室;

Department of Research & Development;

Genetics Institute;

1 Burtt Road;

Andover MA 01810;

USA;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R394.2;
关键词
骨多形性蛋白12; 基因表达; 巨细胞病毒; 腺病毒; 启动子;

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