过氧化物酶体增生物激活受体γ在牙龈卟啉单胞菌刺激血管内皮细胞氧化应激中的作用

李蓬; 万蒙; 刘健如; 李良忠; 张大鹍

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目的:明确牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)刺激人血管内皮细胞时造成氧化应激的损伤程度,探索过氧化物酶体增生物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)γ在此过程的作用。方法:研究设4组,对照组为人血管内皮细胞系EA.hy926(美国标准生物品收藏中心,美国)加培养基,P.gingivalis刺激组为P.gingivalis W83刺激EA.hy926细胞,PPARγ激活组为加入PPARγ的激动剂15d-PGJ2(10μmol/L)的条件下P.gingivalis刺激EA.hy926细胞,PPARγ抑制组为加入PPARγ的拮抗剂GW9662(10μmol/L)的条件下P.gingivalis刺激EA.hy926细胞,在0、0.5、1、1.5、2、4、8、12 h分别留取细胞培养上清液,通过酶联免疫吸附实验检测不同组各时间点培养基中氧化应激产物谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度,利用荧光探针2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(2’,7’-dichlorofluorescin diacetate,DCFHDA)检测不同组各时间点细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)量。结果:在P.gingivalis刺激组,抗氧化应激的产物GSH-PX(5.56±0.97)μmol/L和MDA(0.84±0.18)nmol/L较对照组[GSH-PX(4.71±0.64)μmol/L,MDA(0.59±0.18)nmol/L]显著升高(P<0.05)。GSH-PX和MDA水平在PPARγ激活组[GSH-PX(5.38±0.84)μmol/L,MDA(0.84±0.22)nmol/L]与抑制组[GSH-PX(5.37±0.76)μmol/L,MDA(0.85±0.14)nmol/L]显著高于对照组(P<0.05)。PPARγ激活组,GSH-PX水平在0.5和8 h显著高于1.5至4 h水平(P<0.05),MDA水平各时间点差异无统计学意义。PPARγ抑制组,各时间点GSH-PX和MDA水平差异无统计学意义。P.gingivalis刺激组细胞内的活性氧水平显著高于对照组(10 108.65±1 805.18 vs.6 049.06±1 199.19,P<0.05),PPARγ激活组(7 120.94±1 447.30)和PPARγ抑制组(6 727.35±1 483.68)细胞内的活性氧水平与对照组差异无统计学意义。结论:P.gingivalis刺激人血管内皮细胞可引起氧化应激反应,PPARγ参与调节此过程。

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来源
《北京大学学报：医学版》 |2015年第6期|977-982|共6页
作者
李蓬; 万蒙; 刘健如; 李良忠; 张大鹍;
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作者单位

北京大学口腔医学院.口腔医院第二门诊部;

北京大学口腔医学院.口腔医院牙周科;

解放军第三〇二医院超声科;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病理生理学;
关键词
牙龈卟啉单胞菌; 氧化性应激; PPARγ; 内皮细胞;

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