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染色及激光显微切割对小鼠牙胚组织总RNA完整度的影响

         

摘要

目的:观察以常规染色结合激光显微切割(laser microdissection,LMD)技术精确分离获取小鼠牙胚间充质组织对所获得组织总RNA完整度的影响.方法:以LMD技术获取胚胎17 d(embryonic 17,E17)和出生后2 d(postnatal 2,PN2)两时期CD1小鼠下颌第一磨牙的牙囊和牙乳头组织;提取组织总RNA后再以2100生物分析仪所提供的核糖体RNA 28s/18s比值(28s/18s Ratio)、RNA完整度数值(RNA integrity number,RIN),以及样品电泳图的图形来综合判断样品完整度.结果:与未经LMD切割的对照组相比,经染色及LMD切割的实验组所提取牙胚组织样品总RNA完整度明显降低;非染色仅实行LMD组样品总RNA完整度高于染色及LMD组,但其完整度仍低于通常基因芯片实验要求.结论:常规染色及LMD过程对所提取牙胚组织总RNA完整度有显著影响.

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