变形链球菌UA159磷酸蔗糖变位酶基因功能丧失菌株的构建

段劲; 刘筱娣; 郭丽宏

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变形链球菌UA159磷酸蔗糖变位酶基因功能丧失菌株的构建

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目的:构建变形链球菌UA159磷酸蔗糖变位酶基因(phospho-sugar mutase gene,psm)功能丧失菌株,为进一步研究变形链球菌psm功能做准备.方法:将变形链球菌UA159 psm内部上、下游2段序列分别克隆至自杀质粒pFW5的2个多克隆位点(MCS-Ⅰ和MCS-Ⅱ),构建重组质粒,并经酶切和测序证实.利用同源重组(homologous recombination)原理,采用自然转化的方法,实现重组自杀质粒和变形链球菌UA159同源序列的等位交换(allelic exchange).结果:经过PCR和测序分析,证实变形链球菌UA159基因组中的psm被重组质粒的基因(含有壮观霉素抗性)取代.结论:成功构建了变形链球菌UA159 psm功能丧失菌株.

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来源
《实用口腔医学杂志》 |2008年第1期|69-73|共5页
作者
段劲; 刘筱娣; 郭丽宏;
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作者单位

北京大学口腔医学院生物教研室,100081;

北京大学口腔医学院生物教研室,100081;

北京大学口腔医学院生物教研室,100081;

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正文语种 chi
中图分类口腔病理学;
关键词
变形链球菌; 磷酸蔗糖变位酶基因; 同源重组; 自然转化;

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