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P2X4对帕金森病模型大鼠黑质中α突触核蛋白表达的影响

         

摘要

目的探讨P2X4对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠黑质中α突触核蛋白(α-synuclein)表达的影响。方法将120只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、6-OHDA组、空载病毒阴性对照(P2X4-NC)组、目的基因阴性对照(siRNA-P2X4)组、P2X4-NC+6-OHDA组、siRNA-P2X4+6-OHDA组6组,每组20只大鼠。6-OHDA组、对照组只进行6-OHDA或等量生理盐水黑质定位注射,P2X4-NC组、siRNA-P2X4组分别用脑立体定位仪将空载阴性病毒或携带抑制P2X4表达的目的慢病毒定向注射于大鼠左侧黑质,P2X4-NC+6-OHDA组、siRNA-P2X4+6-OHDA组经黑质定位注射慢病毒2周后,于左侧黑质定位注射6-OHDA。4周后大鼠断头取脑,采用Western blot方法检测大鼠左侧黑质中P2X4、α-synuclein、半胱氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)蛋白的表达,采用免疫组织荧光染色法检测各组大鼠左侧黑质中酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数量的变化。结果与P2X4-NC+6-OHDA组比较,siRNA-P2X4+6-ODHA组P2X4、α-synuclein、caspase-1蛋白的表达量均明显减少(P<0.01),大鼠左侧黑质中TH阳性多巴胺能神经元数量明显增多(P<0.01)。结论抑制P2X4表达可下调黑质中α-synuclein的表达,对多巴胺能神经元有一定保护作用。

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