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KIF3B基因对三阴性乳癌细胞生物学特性和阿霉素化疗敏感性的影响

         

摘要

目的研究KIF3B基因对三阴性乳癌MDA-MB-231细胞生物学特性和阿霉素化疗敏感性的影响。方法用Western blot技术检测KIF3B在人三阴性乳癌细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-468中的表达,取KIF3B高表达细胞MDA-MB-231用于后续实验。用sh-NC质粒转染MDA-MB-231细胞作为对照组,用sh-KIF3B沉默质粒转染MDA-MB-231细胞作为实验组。应用Western blot方法检测基因沉默效率和基因沉默后上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9表达变化,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力变化,流式细胞术检测细胞周期变化,MTT实验检测细胞增殖能力和对阿霉素化疗敏感性的变化。结果KIF3B在三阴性乳癌细胞MDA-MB-231中高表达,而在MDA-MB-468中低表达(t=19.92,P<0.01)。沉默MDA-MB-231细胞KIF3B基因后,细胞迁移、侵袭数目明显减少(t=29.54、18.32,P<0.01),G_(0)/G_(1)期细胞比例降低而G_2/M期细胞比例增加(t=4.82、19.05,P<0.01),同时细胞增殖能力被显著抑制(F=7.56~270.09,P<0.01),对阿霉素化疗敏感性明显增加(F=26.37~167.11,P<0.01),E-cadherin表达升高(t=19.71,P<0.01),而MMP-2和MMP-9表达降低(t=26.57、16.11,P均<0.01)。结论沉默三阴性乳癌MDA-MB-231细胞KIF3B基因表达可以抑制细胞增殖、阻滞细胞周期并增加细胞对阿霉素化疗敏感性,并可以通过EMT抑制细胞迁移和侵袭。

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