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泛素特异性蛋白酶25对KGN细胞胰岛素抵抗的影响

         

摘要

目的用适量胰岛素诱导卵巢颗粒细胞系KGN细胞构建胰岛素抵抗(IR)的模型,探究泛素特异性蛋白酶25(USP25)对KGN细胞IR状态的影响。方法培养KGN细胞,并加入不同浓度胰岛素处理,建立诱导IR细胞模型的适宜胰岛素浓度;敲低KGN细胞中USP25的表达,诱导IR细胞模型,得到4个处理组:未敲低USP25的非IR模型对照组(lv-con-NC)、敲低USP25的非IR模型组(lv-USP25-NC)、未敲低USP25的IR模型组(lv-con-IR)与敲低USP25的IR模型组(lv-USP25-IR)。用Western blot检测葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和胰岛素相关通路p-AKT、AKT的表达水平;用葡萄糖氧化酶法检测细胞培养基上清中葡萄糖的含量,分析4组细胞葡萄糖摄取情况。结果与lv-con-NC组相比,lv-con-IR组葡萄糖摄取量显著下降(P0.05);与lv-con-IR组相比,lv-USP25-IR组的葡萄糖摄取量、GLUT4蛋白表达量和p-AKT蛋白表达量均显著升高(P<0.05)。结论敲低USP25可提高胰岛素信号通路中p-AKT以及GLUT4的表达,从而恢复KGN细胞葡萄糖摄取能力,改善KGN细胞的IR状态。

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