转糖基β-半乳糖苷酶产生菌筛选和鉴定及酶催化生成低聚半乳糖

王红妹; 肖敏; 李正义; 李玉梅; 钱新民

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转糖基β-半乳糖苷酶产生菌筛选和鉴定及酶催化生成低聚半乳糖

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通过水解活性和转糖基活性筛选,从实验室97株保存菌种中获得1株具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶产生菌,克隆并序列分析了该菌株16S rDNA基因片断,GenBank收录号为DQ267829.综合其形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列同源性分析结果,将其鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)2-37-4-1.确定了该菌株β-半乳糖苷酶产酶培养基的碳源为乳糖1%,氮源为蛋白胨0.5%和酵母膏0.5%,培养条件为37℃摇床培养18 h;碳源实验证明,该菌株β-半乳糖苷酶产生为乳糖诱导型.利用薄层层析技术研究了pH值、乳糖底物浓度、反应温度和反应时间对该菌株β-半乳糖苷酶以乳糖为底物转糖基合成低聚半乳糖的影响,确定最适反应条件为pH7.5、50 mmol/L(磷酸缓冲液)配制的40%乳糖溶液,55℃反应24 h.转糖基反应产物高压液相色谱分析其组成为低聚半乳糖25.68%,双糖(包括乳糖和转移二糖)33.02%,葡萄糖26.37%和半乳糖14.92%.

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来源
《山东大学学报：理学版》 |2006年第1期|133-139|共7页
作者
王红妹; 肖敏; 李正义; 李玉梅; 钱新民;
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作者单位

山东大学微生物技术国家重点实验室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类微生物学;
关键词
巨大芽孢杆菌; 16S; rDNA; β-半乳糖苷酶; 转糖基作用; 低聚半乳糖;

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