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红霉素抗性基因ermE在链霉菌中的表达及抗性测定

         

摘要

红霉素抗性基因ermE编码一种甲基化酶,可以对50S核糖体亚基上的23S rRNA进行甲基化修饰.甲基化作用可能引起核糖体构型变化,阻碍红霉素与50S核糖体亚基的结合,从而使宿主获得抗性.研究中将来自红色糖多孢菌(Saccharopolyspora erythraea)的ermE基因克隆到链霉菌高拷贝表达载体pUWL201和pIJ6021上组成型启动子ermEp*和硫链丝菌素诱导型启动子PtipA的下游,构建出了链霉菌表达质粒pKIM4,pKIM7和pKIM8.将pKIM4,pKIM7和pKIM8分别转入S.lividans链霉菌中,每种转化子都能表现出明显的红霉素抗性,并且ermE基因在TK64/pKIM8转化子中还实现了高效表达.

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