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反义硫代寡核苷酸对786-O细胞survivin基因的表达及生长抑制作用

         

摘要

目的研究survivin反义寡核苷酸对肾透明细胞癌786-O细胞表达survivin蛋白、细胞凋亡、增殖的影响.方法设计并合成特异性靶向survivin的反义寡核苷酸(ASODN).肾透明细胞癌细胞株786-O分为6组:空白对照组、脂质体转染对照组、正义链转染对照组、200、400 和600 nmol/L ASODN 转染组.作用24 h后收获各组细胞.倒置显微镜及透射电子显微镜观察细胞形态变化,免疫组化法检测各组细胞survivin表达情况和流式细胞术检测各组细胞周期变化和凋亡指数,MTT 法检测survivin反义寡核苷酸对各组细胞的生长抑制率.结果电镜下可以见到典型凋亡样改变,而各对照组细胞生长良好;各ASODN 转染组细胞survivin表达有不同程度减弱;各ASODN 转染组细胞凋亡指数明显高于各对照组(P<0.05),以600 nmol/L ASODN转染组最为明显(P<0.05),而各对照组间差异无显著性(P>0.05).结论不同浓度survivin ASODN转染后能下调survivin蛋白表达,诱导肾透明细胞癌786-O细胞凋亡,抑制786-O细胞增殖.

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