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老鹳草治疗溃疡性结肠炎的网络药理学研究与体外实验验证

         

摘要

目的运用网络药理学和体外实验系统探讨老鹳草治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法在人类基因综合分析数据库和在线人类孟德尔遗传数据库中检索和筛选了老鹳草的活性成分和相应的溃疡性结肠炎相关靶点,取交集得到重叠靶点后进一步构建基因的蛋白质互作网络,通过拓扑分析筛选出核心靶点。采用R语言进行基因本体和京都基因与基因组百科全书富集物分析。采用佛波酯将体外培养的人髓系白血病单核细胞系THP-1细胞诱导分化为M0巨噬细胞,分别加入不同浓度的老鹳草水煎液预处理,最后加入脂多糖进一步诱导为M1巨噬细胞,流式细胞术检测老鹳草水煎液对M1巨噬细胞极化的影响,酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)及实时逆转录聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测细胞上清液中IL-1β、IL-6和IL-8的含量。结果老鹳草-溃疡性结肠炎靶点网络有7个活性成分和10个核心靶点,IL-6、IL-8和IL-1β是最重要的核心靶点。富集分析表明,IL-6、IL-1β、IL-8富集在肿瘤坏死因子信号通路。体外实验结果表明,老鹳草能显著下调IL-6、IL-8和IL-1β的表达,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术结果表明老鹳草能显著抑制M1巨噬细胞极化,差异有统计学意义(P<0.01)。结论本研究提示老鹳草通过抑制M1巨噬细胞极化及通过肿瘤坏死信号通路下调促炎症因子的释放来改善溃疡性结肠炎的炎症反应。

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