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核转运抑制肽表达载体的构建及对HeLa细胞增殖、迁移的影响

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目的构建核转运抑制肽与红色荧光蛋白(RFP)的融合表达载体,探讨该融合蛋白在HeLa细胞中的表达、定位以及对细胞增殖、迁移的影响。方法分别合成编码两种核转运抑制肽Bimax1和Bimax2的多核苷酸,退火后插入红色荧光蛋白表达载体pDs-Red-C1;质粒转化大肠杆菌DH-5α,挑取阳性菌进行DNA测序;利用脂质体转染法将重组载体pDs-Red-Bimax1、pDs-Red-Bimax2及空白载体转入HeLa细胞中,荧光显微镜观察红色荧光的表达与定位;MTT实验和细胞迁移实验检测融合蛋白表达对细胞增殖、迁移的影响。结果 DNA测序显示,两种核转运抑制肽Bimax1和Bimax2成功插入红色荧光蛋白表达载体;转染真核细胞后Bimax1和Bimax2引导红色荧光蛋白在细胞核表达;同时,融合蛋白RFP-Bimax1和RFP-Bimax2对HeLa细胞的增殖、迁移有抑制作用。结论成功构建核转运特异性抑制肽与红色荧光蛋白融合表达的载体,融合蛋白在细胞核局限表达并能抑制肿瘤细胞的增殖、迁移。

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来源
《四川大学学报：医学版》 |2017年第6期|824-827|共4页
作者
吴周环; 颜瑞巧; 刘建云; 车向新; 熊建军;
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作者单位

江西省系统生物医学重点实验室;

九江332000;

九江学院临床医学院技能中心;

九江332000;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R346;
关键词
核转运; 红色荧光蛋白; 增殖; 迁移;

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