四硫代钼酸铵抑制铜转运蛋白-1用于胰腺癌治疗的体内外研究

赵亚楠; 陈利弘; 杨晓龙; 董婧颖; 吴文兵; 陈丹; 耿瑞蔓; 柯能文; 刘戟

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目的检测胰腺癌细胞、原位异种移植的原位胰腺癌小鼠模型和临床胰腺癌组织标本中铜转运蛋白1(copper transporter 1, CTR1)的表达,并验证铜螯合剂四硫代钼酸铵(ammonium tetrathiomolybdate, TM)通过调控胰腺癌细胞中CTR1的表达对胰腺癌的抑制效果。方法采用免疫组化法检测22例临床胰腺导管癌及距肿瘤0.5~1 cm的癌旁组织标本中CTR1和抗氧化蛋白1(ATOX1)的表达情况。采用PANC-1细胞构建5只原位胰腺癌裸鼠模型,收集胰腺癌组织中及对应的正常胰腺组织,免疫组化法检测CTR1和ATOX1的表达情况,与临床标本进行比较。采用10、30、50、100μmol/L TM处理人胰腺癌细胞株PANC-1 24 h、48 h、72 h后,使用CCK-8法检测细胞增殖情况;50μmol/L TM处理PANC-1 24 h、48 h后,划痕实验检测PANC-1细胞侵袭能力变化;10、30、50、100μmol/L TM处理PANC-1 48 h后,Western blot检测CTR1、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和细胞周期蛋白CyclinD1的表达。采用PANC-1细胞建立裸鼠皮下荷瘤模型,分别给予不同剂量TM(0.3 mg/d,1.0 mg/d)灌胃24 d后,观察肿瘤生长情况。结果免疫组化结果提示,22例临床胰腺导管癌患者组织标本中,19例(86.36%)出现CTR1高表达,且在PANC-1裸鼠原位移植瘤组织中CTR1同样高表达。使用TM处理PANC-1细胞后,细胞增殖抑制程度随着TM剂量的升高、处理时间的延长而逐渐增强;细胞迁移能力下降;胞内CTR1、VEGF和CyclinD1的表达均随着TM剂量的升高而降低。PANC-1荷瘤裸鼠在给予不同剂量TM后,肿瘤生长出现抑制,TM高剂量组的肿瘤体积和肿瘤质量减小更为明显(P<0.05)。结论胰腺癌中CTR1表达异常增高,针对这一靶点使用铜螯合剂治疗可能有助于抑制胰腺癌生长迁移。

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来源
《四川大学学报：医学版》 |2020年第5期|643-649|共7页
作者
赵亚楠; 陈利弘; 杨晓龙; 董婧颖; 吴文兵; 陈丹; 耿瑞蔓; 柯能文; 刘戟;
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作者单位

四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室;

成都610041;

四川大学华西医院胰腺外科;

成都610041;

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正文语种 chi
中图分类胰腺肿瘤;
关键词
胰腺癌; 铜转运蛋白-1; 四硫代钼酸铵;

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