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MIG(CXCL9)表达载体构建及体外活性鉴定

         

摘要

目的构建M IG(CXCL 9)真核表达载体,为利用M IG研究肿瘤基因治疗奠定基础。方法从pBLA ST-M IG上切下含M IG全长的cDNA序列,定向插入pORF-m cs真核表达质粒,构建pORF-M IG重组质粒;然后经酶切分析和测序鉴定后,通过脂质体介导转染CO S-7细胞;再进一步用免疫印迹法鉴定重组质粒的表达活性,用趋化试验鉴定生物学活性。结果pORF-M IG重组质粒经酶切分析和测序证实含有M IG的全长cDNA序列,转染CO S-7细胞后高效表达M IG蛋白,对活化的淋巴细胞有趋化作用。结论成功构建了M IG(CXCL 9)真核表达质粒,为进一步利用pORF-M IG研究恶性肿瘤基因治疗奠定基础。

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