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鼠VEGF红色荧光慢病毒载体的构建及其在293T细胞中的表达

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目的构建含鼠血管内皮细胞生长因子(mVEGF)红色荧光慢病毒载体,鉴定其在293T细胞中的表达。方法构建含mVEGF和红色荧光蛋白(DsRed)基因双顺反子重组慢病毒质粒;采用脂染法将慢病毒系统三质粒共转染293T细胞,转染后24 h和48 h荧光显微镜下观察DsRed表达,收集48 h和72 h病毒上清并感染靶细胞239T,荧光显微镜下观察DsRed表达情况,并行Western blot分析培养上清和胞浆内mVEGF表达。结果成功构建慢病毒表达质粒pTK208-mVEGF-IRES-DsRed,重组慢病毒滴度达5×106PFU/mL,并获得蛋白DsRed和mVEGF的表达。结论含mVEGF红色荧光慢病毒质粒成功介导mVEGF蛋白的表达,该载体有望为研究VEGF的病理生理学机制及基因靶向治疗提供有效的工具。

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来源
《四川大学学报：医学版》 |2010年第2期|199-202|共5页
作者
王东洋; 贾路; 陈翀; 李艳杰; 曾令宇;
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作者单位

徐州医学院移植免疫实验室;

徐州医学院附属医院血液科实验室;

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正文语种 chi
中图分类移植免疫学;
关键词
慢病毒载体; 血管内皮细胞生长因子; 红色荧光蛋白; 293T细胞;

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