短干扰RNA对人β淀粉样前体蛋白裂解酶基因表达的影响(英文)

董炜疆; 冯改丰; 宫惠琳; 刘苏虎; 胡海涛

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目的探讨β淀粉样前体蛋白裂解酶(β-site APP cleaving enzyme,BACE)的短干扰RNA(short interfering RNAs,siRNA)对BACE在神经母细胞瘤细胞中的表达的影响,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供新的手段。方法采用PCR分别扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、U6启动子和靶向BACE的特异性小干扰RNA(siBACE),随后将相应的序列片段克隆入真核表达载体pLXSN,通过限制性内切酶和测序对该重组表达载体pLXSN/ECFP-U6-siBACE进行鉴定;制备稳定高表达BACE基因的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株,用荧光显微镜和免疫组织化学的方法观察siRNA对BACE表达的影响。结果限制性内切酶酶切和测序结果均表明成功构建了靶向BACE的短干扰RNA的逆转录病毒载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE;并能特异性地抑制BACE在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株中的表达。结论成功构建了针对BACE的短干扰RNA的逆转录病毒表达载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE,并能有效抑制哺乳动物BACE基因的表达,该研究将为利用RNA干扰技术作为治疗AD的新方法提供重要的实验基础。

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来源
《四川大学学报：医学版》 |2006年第6期|821-824|共4页
作者
董炜疆; 冯改丰; 宫惠琳; 刘苏虎; 胡海涛;
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作者单位

西安交通大学医学院人体解剖学与组织胚胎学系;

西安变通大学医学院第一附属医院病理科;

西安交通大学医学院第二附属医院血液科;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类人体组织学;
关键词
RNA干扰; BACE; 基因; 阿尔茨海默病;

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