H5N1 和 H9N2 亚型禽流感病毒HA基因的原核表达

黄文科; 林宝珍; 罗琴芳; 牛学锋; 郭霄峰

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H5N1 和 H9N2 亚型禽流感病毒HA基因的原核表达

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采用自行设计的引物,通过PCR的方法,分别从pMD-HA5和pMD-HA9中成功扩增出AIV 0025(HSN1)株和KMⅢ(H9N2)株的血凝素(hemagglutinin,HA)基因,然后分别亚克隆到pET-32a(+)、pET-28a(+)表达载体中,构建并筛选出阳性重组子,分别标记为pET32-HA5、pET28-HA9.将阳性重组质粒转化进B121(DE3)宿主菌中,通过改变IPTG浓度和诱导时间,使重组蛋白获得表达,并确定了最佳诱导条件为IPTG终浓度1.0 mmol/L、诱导时间4～5 h.经SDS-PAGE和 Western-blotting 分析表明,重组蛋白相对分子质量约为85 000和63 000,主要存在于包涵体中,具有良好的免疫学活性.

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来源
《华南农业大学学报》 |2008年第2期|90-9398|共5页
作者
黄文科; 林宝珍; 罗琴芳; 牛学锋; 郭霄峰;
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作者单位

华南农业大学兽医学院;

广东;

广州;

510642;

华南农业大学兽医学院;

广东;

广州;

510642;

华南农业大学兽医学院;

广东;

广州;

510642;

华南农业大学兽医学院;

广东;

广州;

510642;

华南农业大学兽医学院;

广东;

广州;

510642;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类家畜微生物学（兽医病原微生物学）;
关键词
禽流感病毒; HA基因; 基因克隆; 原核表达;

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