腺病毒介导的BMP-2基因转染兔骨髓基质干细胞及对其增殖、成骨分化的影响

崔少千; 范广宇; 李建军; 周凤华; 于洪德; 张磊; 李雷; 王欢

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目的: 用骨形态发生蛋白-2(BMP-2)腺病毒表达载体(Ad-BMP-2)转染兔骨髓基质干细胞(BMSCs),研究转染对其增殖、成骨分化的影响.方法: 用Ad-BMP-2转染兔BMSCs,利用免疫细胞化学法、原位杂交染色和蛋白印迹法检测转染后细胞BMP-2的表达.流式细胞仪观察细胞周期的变化,分析转染对BMSCs增殖的影响.酶标法检测ALP活性;免疫荧光检测骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原表达,分析转染对BMSCs成骨分化的影响.结果: BMP-2基因在转染细胞内mRNA水平和蛋白水平均有较高表达,蛋白印迹法检测到培养液中有BMP-2蛋白阳性表达.流式细胞仪检测G1期、S期细胞比例与空白对照组无差异.ALP活性明显增高,骨钙素、Ⅰ型胶原免疫荧光检测,见胞浆内有大量显绿色荧光的阳性物质.结论: 在腺病毒载体介导下BMP-2基因成功导入BMSCs,细胞增殖未因转染而受影响,并可持续表达基因产物,向成骨细胞分化.

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来源
《东南大学学报（医学版）》 |2009年第1期|22-26|共5页
作者
崔少千; 范广宇; 李建军; 周凤华; 于洪德; 张磊; 李雷; 王欢;
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作者单位

中国医科大学附属盛京医院,脊柱创伤外科,辽宁,沈阳,110004;

中国医科大学附属第一医院,骨科,辽宁,沈阳,110001;

中国医科大学附属盛京医院,脊柱创伤外科,辽宁,沈阳,110004;

中国医科大学附属盛京医院,脊柱创伤外科,辽宁,沈阳,110004;

中国医科大学附属盛京医院,脊柱创伤外科,辽宁,沈阳,110004;

中国医科大学附属盛京医院,脊柱创伤外科,辽宁,沈阳,110004;

中国医科大学附属盛京医院,脊柱创伤外科,辽宁,沈阳,110004;

中国医科大学附属盛京医院,脊柱创伤外科,辽宁,沈阳,110004;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因的表达;
关键词
腺病毒; 骨形态发生蛋白-2; 骨髓基质干细胞; 基因治疗;

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