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乳链菌肽抗性基因的筛选、分离及鉴定

         

摘要

目的筛选、分离、鉴定乳链菌肽抗性(NSR)基因.方法从20份经巴氏消毒的牛奶及未经任何处理的若干新鲜牛奶的混合样品中,在含有添加剂的选择性培养基上筛选含有NSR基因的乳酸乳球菌,用乳酸乳球菌特异性16S rRNA的PCR方法对菌株进行鉴定,进一步用一段保守序列进行NSR基因筛选,并扩增其全序列,分析其基因特征.结果两种牛奶样品中均可以分离到乳酸乳球菌,并在从新鲜牛奶中分离到的乳酸乳球菌中筛选出30株乳链菌肽抗性菌株,其中3株扩增出NSR基因,琼脂糖凝胶电泳确定其大小为1000 bp左右,进一步酶切鉴定及测序确定其确为NSR基因,定位于质粒上.结论从来源于鲜牛奶的抗乳酸乳球菌菌株中扩增出完整NSR基因,定位于质粒上.

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