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棉田Cry1Ac蛋白降解菌株12T-103的分离鉴定及降解能力研究

         

摘要

为分离鉴定棉田转Cry1Ac基因棉的Cry1Ac蛋白土壤降解细菌及测定其降解能力.采用蛋白质凝胶电泳(SDS-PAGE)、酶联免疫法(ELISA)法和常规细菌培养与鉴定技术,对第一师12团棉田土壤中Cry1Ac蛋白降解菌进行分离、纯化、形态生理生化观察以及降解功能测定.结果表明:从棉田土壤分离一株具有降解Cry1Ac蛋白能力的土壤细菌,命名为12T-103菌株,细菌形态学、生理生化特征和16S rDNA序列鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),该菌株对Cry1Ac蛋白的降解效果较为明显,在1h时Cry1Ac蛋白含量由15.95μg·L-1降至0.68μg·L-1,其降解程度达极显著水平(p<0.01),其降解率为92.26%.结论:分离于转基因棉田的12T-103菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),该菌株对Cry1Ac蛋白的降解能力较强.

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