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海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证

         

摘要

提取春季海南五指山美洲商陆叶片总RNA,利用RT-PCR技术获得cDNA,再根据Genbank上公布的PAP-Ⅰ基因序列设计引物扩增PAP-I基因,并连接到pET-30a载体上进行表达,表达的产物以不溶的包涵体形式存在,经过变性、镍柱亲和层析纯化,纯化后的重组蛋白经过Western Blot验证表明该基因得到了正确表达,利用柱上循环复性后的重组PAP-Ⅰ蛋白经麦胚提取物转录/翻译偶联系统验证具有抑制蛋白质合成的活性.

著录项

  • 来源
    《热带生物学报》 |2016年第1期|82-88|共7页
  • 作者单位

    海南大学农学院;

    海南海口;

    570228;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所;

    海南海口;

    571101;

    海南省蛋白质工程药物重点实验室/海口市生命科学药物工程技术研究开发中心;

    海南海口;

    570311;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所;

    海南海口;

    571101;

    海南省蛋白质工程药物重点实验室/海口市生命科学药物工程技术研究开发中心;

    海南海口;

    570311;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所;

    海南海口;

    571101;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因的表达;
  • 关键词

    美洲商陆; 抗病毒蛋白; 载体构建; 原核表达; 海南五指山;

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