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海南龙血树ISSR-PCR反应体系建立与有效引物筛选

         

摘要

采用单因子试验与正交试验的方法,研究了海南龙血树(Dracaena cambodiana Pierre ex Gagnep)ISSR-PCR反应体系中的主要影响因子,筛选出16条有效引物并优化了它们的退火温度,此外还检测了体系的重复性.优化后的25μL反应体系包含:10×PCR buffer 2.5 μL,3.0 mmol/L MgCl2,300 μmol/L dNTPs,Taq聚合酶3.0 U,引物0.2μmol/L,DNA模板20 ng.该反应体系可用于海南龙血树的遗传多样性和遗传结构的分析.

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