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半定量RT-PCR检测细胞因子表达的研究

         

摘要

目的:建立一种客观、敏感的检测IL-2/IL-4细胞因子基因表达变化的方法.方法:采用TRIzol试剂提取免疫排斥/免疫耐受大鼠脾脏组织总RNA,分光光度计法定量.取2μg总RNA,采用RT-PCR法逆转录-扩增IL-2、IL-4和内参照β-actm cDNA,扩增产物经电泳分离后,用凝胶图像分析仪照相和扫描分析,检测其相对表达量.结果:RT-PCR产物经电泳后,β-actin、IL-2和IL-4分别在226 bp、342 bp和332 bp处出现明显条带,与预定条带大小相一致;免疫耐受组IL-4与免疫排斥组IL-2的表达有明显差异,在免疫耐受组中IL-4表达增高,而在免疫排斥组中IL-2表达增高,内参照β-actin扩增条带亮度在两组中相同,PCR产物量与扩增初始模板量之间存在良好的对应关系.结论:半定量RT-PCR检测是一种从少量细胞中快速、简便、可靠地检测特异基因mRNA表达的方法.

著录项

  • 来源
    《新疆医科大学学报》 |2003年第5期|427-429|共3页
  • 作者单位

    新疆医科大学第一附属医院中心实验室,新疆包虫病基础医学重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830054;

    新疆医科大学基础医学院免疫学教研室,新疆,乌鲁木齐,830054;

    新疆医科大学第一附属医院中心实验室,新疆包虫病基础医学重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830054;

    新疆医科大学新疆器官移植研究所,新疆,乌鲁木齐,830054;

    新疆医科大学第一附属医院中心实验室,新疆包虫病基础医学重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830054;

    新疆医科大学第一附属医院中心实验室,新疆包虫病基础医学重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830054;

    新疆医科大学第一附属医院中心实验室,新疆包虫病基础医学重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830054;

    新疆医科大学第一附属医院中心实验室,新疆包虫病基础医学重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830054;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R34;
  • 关键词

    细胞因子; 半定量逆转录-PCR; 表达;

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