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血清总同型半胱氨酸候选参考测量程序(液相色谱串联质谱法)的建立及性能评估

         
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目的 建立一种基于液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术的血清总同型半胱氨酸(Hcy)候选参考测量程序并对其性能进行评价.方法 采用一种简单的蛋白沉淀方法对血清样本进行前处理,然后采用LC-MS/MS定量检测总Hcy,参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)C62-A文件和C50-A文件对建立的候选参考方法进行线性、检测限与定量限、基质效应、精密度、正确度等基本分析性能验证.结果 LC-MS/MS检测总Hcy的线性范围为0.5～200.0μmol/L.定量限和检测限分别为0.31 nmol/g、0.06 nmol/g.3种不同比例(1:1、80:20、20:80)的血清与溶液混合物的相对基质效应分别为1.94％、1.91％、1.78％.批内、批间变异系数(CV)分别为<2％和<1％.3种浓度(30.58、49.21、65.42 nmol/g)的加标样本平均加标回收率分别为99.8％、100.2％、100.8％.测定NIST SRM 1950标准物质的结果偏移<1％.样本处理后分别在室温[(23±2)℃]和自动进样器(温度为10℃)中放置24 h,检测结果均非常稳定.结论 成功建立了基于LC-MS/MS技术的血清总Hcy候选参考测量程序.该参考测量程序准确度高、精密度好,能够用于常规临床检验方法的量值溯源,保证测定结果的准确性.

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