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原钙黏蛋白7b与绿色荧光蛋白融合基因表达载体的构建及其在MCF10A细胞中的表达定位

         

摘要

目的:构建原钙黏蛋白7b(PCDH7b)与绿色荧光蛋白(GFP)的融合基因表达载体pQCXIP-PCDH7b-EGFP,并检测PCDH7b-GFP融合蛋白在细胞中的表达定位.方法:以MDA-MB-436细胞基因组DNA为模板,PCR扩增人PCDH7b基因,克隆入逆转录病毒载体pQCXIP-EGFP-N1构建pQCXIP-PCDH7b-EGFP,病毒包装后感染人乳腺上皮细胞系MCF10A,免疫荧光染色检测其与膜蛋白E钙黏蛋白的相对表达定位.结果:构建获得逆转录病毒载体pQCXIP-PCDH7b-EGFP,融合蛋白PCDH7b-GFP定位于细胞浆和细胞膜,与E钙黏蛋白有共定位.结论:PCDH7b-GFP融合蛋白的表达,为后续活细胞成像分析PCDH7b在细胞内的动态分布奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《生物技术通讯》 |2016年第3期|322-325|共4页
  • 作者单位

    军事医学科学院生物工程研究所,北京100071;

    山西医科大学第二临床医院肿瘤内科,山西太原030001;

    郑州大学附属肿瘤医院乳腺外科,河南郑州450008;

    军事医学科学院生物工程研究所,北京100071;

    华南理工大学生物工程系,广东广州510006;

    郑州大学附属肿瘤医院乳腺外科,河南郑州450008;

    军事医学科学院生物工程研究所,北京100071;

    军事医学科学院生物工程研究所,北京100071;

    军事医学科学院生物工程研究所,北京100071;

    郑州大学附属肿瘤医院乳腺外科,河南郑州450008;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因工程(遗传工程);
  • 关键词

    原钙黏蛋白7; 基因克隆; 亚细胞定位;

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