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CAR-T细胞制备过程中磁珠法激活T细胞条件的优化

         

摘要

目的:研究CAR-T细胞制备过程中,磁珠法体外激活人类原代T细胞的最佳条件.方法:新鲜分离的人外周血单个核细胞(PBMCs)与anti-CD3/CD28抗体包被的Dynabeads磁珠按3种不同的比例,于22℃混合孵育30 min,以激活T细胞.随后,通过细胞自动计数,检测不同激活条件对细胞活力和直径的影响;利用流式细胞术检测CD3+T细胞所占比例;连续监测并绘制T细胞生长曲线,分析激活条件对T细胞增殖速度的影响.结果:以3种激活条件处理的细胞,在激活早期,细胞活力随着磁珠数的增加而降低;流式细胞术检测结果表明,随着磁珠数的降低,CD3+T细胞所占比例呈上升趋势.然而,只有当PBMCs数与磁珠数比例为1:1时,T细胞的生长速度最快,在第15 d时可扩增50倍.结论:T细胞激活条件对细胞活力及增殖有重要影响,PBMCs数与磁珠数比例为1:1有利于T细胞快速扩增,这对在较短时间内获得足够的T细胞,缩短整个CAR-T细胞制备周期具有较重要的意义.

著录项

  • 来源
    《生物技术通讯》 |2018年第6期|789-795|共7页
  • 作者单位

    军事科学院 军事医学研究院 生物工程研究所,北京 100071;

    军事科学院 军事医学研究院 生物工程研究所,北京 100071;

    安徽大学 健康科学学院,安徽 合肥 230000;

    军事科学院 军事医学研究院 生物工程研究所,北京 100071;

    军事科学院 军事医学研究院 生物工程研究所,北京 100071;

    军事科学院 军事医学研究院 生物工程研究所,北京 100071;

    军事科学院 军事医学研究院 生物工程研究所,北京 100071;

    军事科学院 军事医学研究院 生物工程研究所,北京 100071;

    军事科学院 军事医学研究院 生物工程研究所,北京 100071;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 人体细胞学;
  • 关键词

    CAR-T细胞; CD3; CD28; 细胞激活; 细胞增殖;

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