GHSR1a shRNA慢病毒载体的构建及其对体内直肠癌生长和凋亡的影响

黄成钢; 蔡学宏; 徐佳; 张三军

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GHSR1a shRNA慢病毒载体的构建及其对体内直肠癌生长和凋亡的影响

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目的：探讨GHSR1a shRNA慢病毒载体的构建及其对体内直肠癌生长和凋亡的影响。方法构建特异性靶向GHSR1a基因的shRNA慢病毒表达载体和阴性对照序列慢病毒载体；通过慢病毒感染建立稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞(KD)、阴性对照细胞(NC)及空白对照细胞(BC)，RT-PCR检测GHSR1a mRNA在细胞中的表达；建立裸鼠直肠癌SW480细胞皮下移植瘤模型，实验结束后处死裸鼠并测量各组裸鼠肿瘤重量；免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67的阳性表达，TUNEL法检测细胞凋亡。结果在体外实验中，通过荧光表达情况及流式细胞学结果表明成功建立稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞；SW480细胞感染GHSR1a shRNA后，KD组细胞中GHSR1a mRNA的表达明显高于BC组或NC组(<0.001)；在体内实验中，KD组裸鼠直肠癌皮下移植瘤重量明显低于BC组或NC组(=0.011)；KD组移植瘤细胞凋亡指数明显高于BC组或NC组(<0.001)，同时Ki-67在KD组移植瘤细胞中的阳性表达显著低于BC组或NC组(<0.001)。结论成功建立稳定感染GHSR1a shRNA的直肠癌SW480细胞，沉默GHSR1a后对体内人直肠癌细胞生长有明显抑制作用，并促进细胞凋亡，表明GHSR1a基因有可能成为新的直肠癌治疗作用靶点。

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来源
《医学信息》 |2016年第15期|179-181|共3页
作者
黄成钢; 蔡学宏; 徐佳; 张三军;
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作者单位

湖南省岳阳市一人民医院;

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湖南省岳阳市一人民医院;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
直肠癌; GHSR1a; shRNA;

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