cqvip:目的研究AMD3100联合G-CSF对糖尿病骨髓内皮祖细胞的培养方法和生物学功能。方法选用6周龄健康雄鼠,将10只db/db小鼠设为db/db组,10只db/+小鼠设为db/+组。采用AMD3100与CSF联合动员骨髓内皮祖细胞的方法,每只小鼠第1天注射AMD3100,后续连续注射5 d G-CSF,在第10天心脏采血制备EPCs。采用流式细胞仪检测CD34^+/CD133^+/CD309^+细胞的比例进行鉴定,鉴定成功的EPCs采用CCK-8法、Matrigel检测细胞增殖及成管功能。采用PCR检测细胞表面标志物:血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子(SDF-1)、趋化因子受体4(CXCR4)基因表达情况。结果①从处理后的第3天开始,db/+组的OD450值较db/db组增高(P=0.05);②0和48 h db/+组EPCs迁移面积分别为(204088.100±219.200)μm、(144724.900±199.400)μm,大于db/db组的(200985.700±232.600)μm、(155075.300±213.100)μm(P<0.05);③db/+组管腔形成数量为(29.330±1.764)个,多于db/db组的(24.000±2.082)个(P<0.05)。结论采用AMD3100联合G-CSF动员2型糖尿病骨髓内皮祖细胞的方法成功从外周血中分离出EPCs,经体外培养发现2型糖尿病状态下EPCs的增殖,迁移和成管等功能均受损。
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