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FACSAriaⅢ流式细胞仪分选小鼠肺脏自然杀伤细胞方法的建立与评价

         

摘要

目的 利用流式细胞仪分选小鼠肺脏自然杀伤细胞(NK细胞)并检测分选后细胞纯度与存活率.方法 小鼠肺脏经胶原酶灌注法得到单细胞悬液,流式细胞仪分选悬液中FVS510-CD3-CD19-NK1.1+NKp46+细胞,分选后的细胞流式细胞仪回测阳性率,台盼蓝染色检测细胞活力.结果 第一滴液流断点位置Drop1为345,Gap为9,液流开启0.5 h以上无晃动,无断点位置改变,稳定性良好,各种参数符合分选条件.分选前NK细胞占总细胞(4.40±1.20)%Total,分选后为(96.10±2.20)%Total,差异有统计学意义(P<0.05).经台盼蓝染色显示,分选后细胞存活率为(95.70±2.02)%,细胞形态良好.结论 利用流式细胞分选仪可快速高效分离小鼠肺脏NK细胞,分选后的细胞保持良好的活性,可为进一步研究NK细胞提供保证.

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