应用辣根过氧化物酶化学发光法检测毒素原性大肠杆菌方法的建立

林万明; 徐健雄

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应用辣根过氧化物酶化学发光法检测毒素原性大肠杆菌方法的建立

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利用活化酶标复合物（HRP－PBQ－PEI＋－NH3＋）直接标记毒素原性大肠杆菌不耐热肠毒素（ETEC－LT）基因片段（0．8kb）作探针。HRP在戊二醛作用下与单链靶DNA形成DNA和酶的共价复合物，与DNA探针结合的辣根过氧化物酶（HRP）催化相应的发光刺，经增强型化学发光反应（ECL）在普通X光胶片上自显影（CPD）检测ETEC－LT。结果可检测到0．03pg的纯质粒DNA和103的ETEC菌细胞，dotblot杂交证明该酶标基因探针仅与产LT肠毒素的ETEC杂交，其余均未见杂交阳性反应。结果表明酶（HRP）标基因探针化学发光法检测ETEC是一种简便、快速、安全，高度敏感和特异的非放射性标记基因探针检测技术。

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来源
《空军航空医学》 |1994年第2期|70-73|共4页
作者
林万明; 徐健雄;
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作者单位

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正文语种 chi
中图分类肠炎;微生物学检验;
关键词
辣根过氧化物酶化学发光; 检测; 毒素原性大肠杆菌; 核酸杂交; 核酸探针; 腹泻;

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