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纤维连接蛋白模拟肽P19的实验研究

         

摘要

目的研究无机骨修复材料的生物化,设计合成了纤维连接蛋白模拟肽P19,以便通过此途径改善羟基磷灰石(HA)类骨修复材料的生物活性.方法运用固相多肽合成技术合成了P19,用Sephadex G-15对其进行初步纯化和空气氧化法修饰,并行质谱(TOF-MS)鉴定,对其生物活性及与HA结合的特性进行了研究.结果 P19和HA具有较高的亲和力,能够影响凝胶系统体外矿化作用;对于HA的解离常数(Kd)为14.3±0.8μmol/L,100μg HA最大吸附多肽量为2.57±0.51nmol.吸附的多肽在生理条件下不能被洗脱.生理浓度的钙离子能够明显增加HA吸附的多肽量,磷酸根能够抑制多肽和HA的结合.P19能够明显增加培养板表面成骨细胞附着量.竞争性抑制实验结果表明,用P19处理的成骨细胞无法吸附到纤维连接蛋白包被的培养板表面,并表现为剂量效应,其作用强于GRGDSP六肽.结论所合成的多肽分子具有纤维蛋白样活性,且能稳定的结合于HA,可作为HA类骨损伤修复材料以及种植体HA涂层的生物活性添加成分,有一定的临床应用前景.

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