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产木质纤维素降解酶真菌的筛选及产酶特性

         

摘要

【背景】利用微生物处理秸秆引起研究者的广泛关注。【目的】筛选生长速度快、木质纤维素降解酶活性强的真菌菌株,用于植物秸秆降解和高效利用。【方法】从自然界采集的样品中分离纯化真菌菌株,利用PDA-愈创木酚和PDA-羧甲基纤维素钠平板初筛,再经过液体发酵检测漆酶酶活、羧甲基纤维素酶酶活及菌丝生长速率复筛目的菌株,通过内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)测序法对目的菌株进行鉴定,对目的菌株产漆酶和羧甲基纤维素酶活力进行测定及酶学性质研究。【结果】从样品中分离纯化到18株真菌,通过初筛筛选出9株产木质纤维素降解酶真菌菌株,再经过复筛,筛选出一株产漆酶、羧甲基纤维素酶活力高、菌丝生长快的菌株M1,经过分子生物学鉴定M1为糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus),其漆酶酶活为(243.59±1.11)U/mL,羧甲基纤维素酶酶活为(36.03±0.63)U/mL。在5 d的培养期内,菌丝生长速率为(9.43±0.32)mm/d。对菌株M1的发酵粗酶液的酶学性质进行了检测分析,结果表明,所产的漆酶在pH5.0-6.5相对酶活为90%以上,在pH 5.5的介质中最为稳定,在低于55℃环境稳定性较高,相对酶活90%以上;该菌所产羧甲基纤维素酶在pH 5.5-6.5相对酶活为90%以上,在pH 6.0的介质中最为稳定,在低于60℃环境相对稳定性较高,相对酶活90%以上。【结论】本研究筛选到的菌株M1具有较高的漆酶和羧甲基纤维素酶活性,具有降解木质素和纤维素的潜力,为植物秸秆的生物降解提供了有效的菌种资源。

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