响应面法建立层析纯化去除百日咳丝状血凝素中内毒素工艺

高娜; 孙明波; 梁疆莉; 马艳; 邓燕; 姬秋彦; 顾琴; 李菁; 胡文著; 史荔

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[背景]无细胞组分百日咳疫苗在人群中接种后不良反应发生率大大降低,是未来百日咳疫苗的发展方向,但是新的抗原纯化方式需要工艺中加入内毒素的去除.[目的]使用响应面法优化层析纯化法去除无细胞百日咳疫苗中百日咳丝状血凝素(Filamentous hemagglutinin,FHA)中内毒素的工艺.[方法]通过单因素试验,确定响应面设计范围;根据响应面法设计原理,使用MiniTAB软件,以FHA的回收率和收获的FHA蛋白浓度,同时兼内毒素合格为考察指标,对上样样品量、样品pH、样品电导Cond进行优化,最终确定去除FHA内毒素的层析纯化工艺.[结果]使用目前的层析纯化条件获得的Capto adhere去除FHA的内毒素的最佳工艺条件:pH 5.3,Cond 9.6,Mass 3.0.[结论]用响应面法优化了去除百日咳丝状血凝素中内毒素的层析纯化工艺,这种方法效率高、耗时少,为后续生物制品工艺扩大再生产提供参考.

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来源
《微生物学通报》 |2018年第6期|1384-1392|共9页
作者
高娜; 孙明波; 梁疆莉; 马艳; 邓燕; 姬秋彦; 顾琴; 李菁; 胡文著; 史荔;
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作者单位

中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118;

中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118;

中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118;

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中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118;

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关键词
百日咳丝状血凝素; 内毒素; 响应面法;

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