高效产氢菌B49菌株adh和L-ldh基因克隆及序列分析

林海龙; 任南琪; 郑国香; 张坤

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设计细菌adh基因和L-ldh基因简并引物,采用降落PCR并结合Cassette PCR方法从高效产氢菌B49中扩增全长基因.共获得两段基因组DNA片段.其中一段序列长1902 bp.包括adh基因开放阅读框 1101 bp,共编码366个氨基酸,编码产物分子量为 39.71 kD,理论等电点为pH5.93.该基因与Clostridium thermocellum ATCC 27405的adh位点序列一致性为73%.另一段序列长2490bp,包括L-ldh基因开放阅读框951 bp,共编码316个氨基酸,编码产物分子量为34.23 kD,理论等电点为pH 6.09.该基因与Bacillus megaterium的L-ldh位点一致性为74%.试验结果表明,采用CodeHop和Genefisher程序化设计的简并引物可信性强,阳性率高,CodeHop设计简并引物效果要好于Genefisher.adh和L-ldh的成功克隆为通过代谢工程手段敲除adh和L-ldh基因提供了科学依据,从而为进一步提高B49产氢能力的代谢工程研究奠定基础.

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来源
《微生物学通报》 |2008年第5期|788-797|共10页
作者
林海龙; 任南琪; 郑国香; 张坤;
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作者单位

哈尔滨工业大学市政环境工程学院,哈尔滨,150090;

哈尔滨工业大学市政环境工程学院,哈尔滨,150090;

哈尔滨工业大学市政环境工程学院,哈尔滨,150090;

哈尔滨工业大学市政环境工程学院,哈尔滨,150090;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类微生物学;
关键词
引物设计; 乙醇脱氢酶; L-乳酸脱氢酶; Ethanoligenens harbinense B49;

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