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几丁质酶表达质粒pKChiA和pMChiA的构建及表达

         

摘要

从质粒pLCHIA中切出含粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)几丁质酶基因(chiA)的1.8kb HinfI片段,将其插入到表达载体pKK223-3强启动子Ptac下游的SmaI位点内,构建成几丁质酶表达质粒pKChiA.再用内切酶BamHI从pKChiA质粒中切出2.1kb PtacChia片段,并将其重组到质粒pMC71A的单一BarnHI位点内,构建成另一种几丁质酶表达质粒pMChiA.这两种质粒可在大肠杆菌HB101和JM105高效表达,几丁质酶表达水平比质粒pLCHIA高1~3倍.

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