基于聚合酶螺旋反应技术快速检测铜绿假单胞菌

朱渊; 戴云山; 王俊虎; 王萍; 吕凤霞; 顾秋琴

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基于聚合酶螺旋反应技术快速检测铜绿假单胞菌

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摘要

[背景]铜绿假单胞菌是一种重要的水源和食源性致病菌,可引起急性肠道炎、脑膜炎、败血症和皮肤炎症等疾病.加强铜绿假单胞菌的快速检测,对保障食品安全具有重要的意义.[目的]建立聚合酶螺旋反应(Polymerase spiral reaction,PSR)方法快速检测铜绿假单胞菌.[方法]针对铜绿假单胞菌外毒素A调控基因——ETA基因(toxA)设计引物,通过引入加速引物、优化反应条件和筛选颜色指示剂,建立快速检测铜绿假单胞菌的PSR方法,并研究方法的特异性、敏感性和可靠性.[结果]建立的方法在等温65℃条件下,40 min内可完成PSR反应,且可通过钙黄绿素和羟基萘酚蓝直接判读结果.方法特异性强、灵敏度高,最低检出限分别为20 CFU/mL细菌和1.011 5 pg/μL基因组DNA.可视化PSR方法检测包装饮用水来源的分离菌株与传统生化方法检测结果一致.[结论]研究建立的可视化PSR方法为铜绿假单胞菌DNA快速检测提供了一种可行的有效手段.

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来源
《微生物学通报》 |2019年第5期|1246-1256|共11页
作者
朱渊; 戴云山; 王俊虎; 王萍; 吕凤霞; 顾秋琴;
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作者单位

泰州市食品药品检验所江苏泰州 225300;

泰州市食品药品监督管理局江苏泰州 225300;

泰州市食品药品检验所江苏泰州 225300;

泰州市食品药品检验所江苏泰州 225300;

南京农业大学食品学院江苏南京210095;

泰州市食品药品检验所江苏泰州 225300;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
铜绿假单胞菌; 聚合酶螺旋反应; 等温扩增; DNA快速检测;

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