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酞菁锌介导的光动力学疗法对骨髓净化的实验研究

摘要

目的研究酞菁锌光敏剂(ZnPcS2P2)介导的光动力学疗法(PDT)对模拟慢性粒细胞白血病缓解骨髓的净化作用.方法采用荧光分光光度法检测K562细胞及正常细胞内的光敏剂含量.锥虫蓝拒染法、MTT比色法、克隆形成实验检测不同浓度ZnPcS2P2介导的PDT对K562细胞增殖能力的影响.正常混合集落形成细胞(CFU-Mix)、粒-单核系造血祖细胞(CFU-GM)、红系祖细胞(CFU-E)等集落形成实验检测ZnPcS2P2PDT对正常造血祖细胞的影响.巢式PCR方法检测酞菁锌介导的PDT作用前后混有不同比例K562细胞的骨髓细胞的bcr-abl mRNA表达.结果(1)与ZnPcS2P2共孵育5 h,K562细胞与骨髓正常单个核细胞(MNC)内的ZnPcS2P2含量分别为10.1、2.2(ng/5×105细胞),二者比值达到最高值.(2)0.25μg/ml ZnPcS2P2孵育5 h后,用670 nm激光以53mW/cm2的功率密度、2.1J/cm2的能量密度照射对K562细胞集落形成的抑制率为91.1%,而对正常CFU-Mix、CFU-GM、CFU-E等集落形成的抑制率分别为18.0%、18.6%、17.8%.(3)0.25 μg/mlZnPcS2P2介导的PDT可完全杀灭按1:100至1:1 000比例混入骨髓正常MNC中的K562细胞.结论ZnPcS2P2介导的PDT能选择性杀伤K562细胞,有希望成为新的高效而简便的慢性粒细胞白血病骨髓净化手段.

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