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慢性肾功能不全幼鼠胫骨生长板软骨细胞初级纤毛表达对Wnt/β信号通路的影响

         
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目的 观察慢性肾功能不全（CRI）幼鼠胫骨生长板软骨细胞初级纤毛表达对Wnt/β信号通路的影响。方法 雄性2周龄SD幼鼠12只,分为假手术组（暴露左侧输尿管,6只）和CRI组（结扎左侧输尿管,6只）。术后2周处死幼鼠,观测胫骨生长板区软骨细胞初级纤毛及Wnt/β通路关键蛋白β-连环蛋白（β-catenin）的表达。提取两组幼鼠胫骨生长板软骨细胞进行体外培养至P3代,检测细胞初级纤毛及β-catenin表达。应用Wnt/β通路激动剂、拮抗剂干预CRI组软骨细胞,检测细胞初级纤毛表达率；应用无血清培养、水合氯醛干预CRI组软骨细胞,检测β-catenin表达水平。结果 与假手术组相比,CRI组胫骨生长板区软骨细胞初级纤毛表达率增高[（17.5±7.7）%比（8.7±3.6）%,t=3.237,P=0.005],β-catenin表达免疫组化组织学评分增高[（5.1±0.7）分比（1.9±0.8）分,t=6.731,P＆0.001]。软骨细胞体外培养在CRI组细胞初级纤毛表达率增高[（20.9±8.1）%比（11.8±4.7）%,t=3.073,P=0.007],Western印迹结果显示β-catenin表达增高（0.49±0.12比0.25±0.11,t=3.297,P=0.011）。应用Wnt/β通路激动剂和拮抗剂改变β-catenin表达水平后细胞初级纤毛表达率无明显变化[激动剂组（21.3±7.6）%,对照组（20.6±6.8）%,拮抗剂组（22.4±6.2）%,F=0.173,P=0.842]；应用无血清培养、水合氯醛改变细胞初级纤毛表达率后,β-catenin蛋白表达量改变（无血清组0.61±0.23,对照组0.39±0.24,水合氯醛组0.15±0.11,F=6.476,P=0.012）,且与细胞初级纤毛表达率呈正相关。结论 肾功能不全幼鼠胫骨生长板软骨细胞初级纤毛及Wnt/β通路均呈高表达,初级纤毛可能对Wnt/β通路存在正性调控作用。

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