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枸杞多糖改善肾小管上皮细胞间质纤维化的研究

         

摘要

目的探讨枸杞多糖(LBP)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞间质纤维化的影响及其作用机制。方法体外培养人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2),分为对照组、TGF-β1组和LBP+TGF-β1组。TGF-β1组细胞给予10 ng/mL TGF-β1,处理24h;LBP+TGF-β1组细胞给予10 ng/mL TGF-β1处理24 h后,再给予20 mmol/L LBP干预24 h;对照组细胞不做任何处理。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Vimentin,纤连蛋白(FN),Snail和E-adherin的mRNA表达水平;通过RT-qPCR和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测胶原蛋白Ⅰ(ColⅠ)和胶原蛋白Ⅲ(ColⅢ)的表达;通过Western blot检测细胞中TGF-β1和smad3的表达水平。结果RT-qPCR结果表明与对照组相比,TGF-β1组HK-2细胞Vimentin、FN、Snail的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),E-adherin mRNA的表达水平显著降低(P<0.05);α-SMA、Col I和Col III的mRNA表达也显著上升(P<0.05);ELISA显示HK-2细胞上清液中ColⅠ和ColⅢ水平升高(P<0.05);Western blot检测TGF-β1和smad3蛋白的表达水平显著升高(P<0.05)。给予LBP干预后,与TGF-β1组相比,LBP+TGF-β1组Vimentin、FN、Snail的mRNA表达水平显著降低(P<0.05),E-adherin mRNA的表达水平显著升高(P<0.05),α-SMA、Col I和ColⅢ的mRNA表达水平显著降低(P<0.05);上清液中ColⅠ和ColⅢ水平降低(P<0.05);细胞中TGF-β1和smad3蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。结论LBP可缓解肾小管上皮细胞间质纤维化,其机制可能与TGF-β/smad信号通路有关。

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