表达口蹄疫病毒多表位基因重组腺病毒的构建

苏春霞; 段相国; 张艳丽; 摆茹

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表达口蹄疫病毒多表位基因重组腺病毒的构建

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目的构建串联表达通用型辅助性T淋巴细胞表位(PARDE)和口蹄疫病毒多表位基因的重组腺病毒,并对其进行鉴定.方法将PARDE串联FMDV的多表位基因克隆到腺病毒的穿梭载体中,利用电转化技术将线性化的阳性穿梭质粒与腺病毒骨架载体pAdeno VatorΔE1/E3共转化大肠杆菌BJ5183感受态细胞,将筛选到的重组病毒质粒经PacⅠ酶线性化后,通过脂质体LipofectamineTM2000转染HEK-293A细胞后得到重组腺病毒,再用RT-PCR和Western-blot检测多表位基因在重组腺病毒中的表达.结果成功构建了串联表达PARDE和FMDV多表位基因的重组腺病毒rAd5-EGS,Western-blot检测重组腺病毒rAd5-EGS能与FMDV阳性血清发生反应.结论重组腺病毒rAd5-EGS具有抗原性,经过连续传代至10代后效价稳定.

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来源
《宁夏医学杂志》 |2009年第12期|1111-1112|共2页
作者
苏春霞; 段相国; 张艳丽; 摆茹;
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作者单位

宁夏医科大学,宁夏,银川,750004;

宁夏医科大学检验系,宁夏,银川,750004;

宁夏医科大学,宁夏,银川,750004;

宁夏医科大学,宁夏,银川,750004;

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正文语种 chi
中图分类免疫遗传学;
关键词
口蹄疫病毒; 重组腺病毒; 表位基因;

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