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矮牵牛CHS基因启动子克隆、序列分析及植物表达载体构建

         

摘要

应用Primer Premier 5.0软件,根据GenBank数据库报道的查尔酮合成酶基因启动子序列(EF199747)设计1对特异性PCR扩增引物,以矮牵牛品种'午夜蓝色'叶片总DNA为模板,用Taq DNA聚合酶成功扩增出1条约0.5 kb的DNA片段,回收该片段并连接到pMD18-T载体上.结果表明:经测序该启动子片段长550 bp;bl2seq分析结果表明该启动子与目标序列相似性高达100%;PLACE在线分析显示在克隆片段中含有TATA box、CAAT box、cap site、anther box、box1、box2、G box及TACPyAT-box等顺式元件;并构建了矮牵牛CHS基因启动子融合标记基因GUS的植物表达载体pPhCHS::GUS.

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